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異硫氰酸胍常用的方法

發布時間 :2020-3-11 訪問人數 : 2158

異硫氰酸胍(GITC) ,CAS593-84-0 ,是一種超親性試劑 ,常用的蛋白質變性劑 ,但最常用於DNARNA的提取 。

常用的方法是硫氰酸鹽-苯酚-氯仿萃取法 。如果提取RNA用於Northern blotting 或提取DNA用於 Southern blot analysis ,則不必嚴格使用苯酚或氯仿 ,因為凝膠電泳後轉移到膜上將RNA/DNA從蛋白質中分離出來 。此外 ,由於這些方法使用探針與它們的偶聯物結合 ,因此 ,通過這一過程的肽通常不重要 ,除非肽是RNaseDNase ,而且隻有在該酶設法重新生成時才重要 ,如果遵循適當的協議 ,就不應該發生這種情況 。一個可能的例外可能是在處理溫度極端微生物時 ,因為這些微生物的一些酶在特殊情況下可以保持穩定 。

異硫氰酸胍還可用於RNADNA提取中的細胞和病毒顆粒的裂解 ,其功能除了裂解作用外 ,還可通過使RNA酶和DNase酶變性來阻止它們的活性 。否則這些酶會破壞提取物 。

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