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HEPES緩衝液配製方法
HEPES溶液 :一種弱酸 ,中文名字是4-羥乙基呱嗪乙磺酸 。用作生物緩衝試劑 ,可配製蛋白提取緩衝液 、細胞培養用緩衝液等 。pH範圍6.8-8.2 。
關於 HEPES 緩衝溶液的配製 , 不同的文獻資料有不同的說法 。 根據用途 , 一種是單純的 HEPES+NaOH , 另一種是 HEPES+鹽 。各種配製方法總結如下 :
一 、500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution 的配製
119.15 g HEPES 溶解在 400ml 蒸餾水中 ,加 0.5~1M的NaOH水溶液調節至少所需pH(HEPES 的有效 pH 範圍是 6.8~8.2) ,然後用蒸餾水定容至 500ml ,於 4 攝氏度保存 。
二 、加少量鹽的 HEPES Buffer 配方(500ml)
HEPES 6.5g 、NaCl 8.0g 、Na2HPO4·7H2O 0.198g ,用 0.5M NaOH 水溶液調節pH值 ,最後定容 。
三 、2×HEPES 緩衝鹽溶液的配製
將 1.6g NaCl 、0.074g KCl 、0.027g Na2HPO4·2H2O 、0.2g 葡聚糖(glucan or dextran)和 1g HEPES 溶 解在 90ml 的蒸餾水 ,用 0.5M NaOH 調節至所需 pH 值 ,再用蒸餾水定容至 100ml 即可 。