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乙酰丁香酮的應用原理和配置方法
乙酰丁香酮的應用原理和配置方法
乙酰丁香酮是一種酚類化學物
,可誘導膿杆菌Vir基因的活化
,從而促進外源基因的整合
。作用機理是通過誘導農杆菌Vir區基因的活化與表達
,促進T-DNA的加工與轉移
,從而促使農杆菌T-DNA更容易進入植物基因組並與其整合
。
乙酰丁香酮(AS)的作用原理
,是其可誘導農杆菌Vir基因活化
,從而促進外源基因的整合
。所以最好讓其有一定的誘導時間再轉化
,效果要好些
,而不是加完後直接轉化(需要活化)
乙酰丁香酮的配製方法
:
1
、用於擬南芥花侵染的
,配製使用的溶劑為DMSO
,母液為100mM
,使用濃度請參照相關文獻
。
2
、另外一種是用於愈傷組織的侵染
,是用少量甲醇溶解後
,再用蒸餾水定容
。之後過濾除菌
。顯然兩者溶劑不一樣
,不過建議還是使用DMSO
。
乙酰丁香酮使用方法
:
一般使用終濃度為100-200 umol/L
。可用DMSO溶解
,配置1M母液
,分裝-20度保存
。轉化前
,將乙酰丁香酮加入轉化緩衝液
,冰上放置約1 h後即可使用
。
乙酰丁香酮貯存條件
:密封室溫保存